产地 | 上海 |
品牌 | XKBio |
货号 | XK5049 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 5 mg |
纯度 | 100% |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
5(6)-TAMRA-C5-maleimide(5(6)-TAMRA-C5-马来酰-亚胺)产品说明书
5(6)-TAMRA-C5-maleimide(5(6)-TAMRA-C5-马来酰-亚胺)
产品货号:XK5049
产品规格:5 mg
应用范围:荧光标记试剂
产品参数
外观:可溶于 DMSO 或DMF 的红色固体
Ex/Em:540/565 nm (MeOH)
分子式:C34H34N4O6
分子量:594.66
分子结构图:
储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
5(6)-TAMRA-C5- maleimide 是硫醇反应性罗丹明染
料。当染料与蛋白质结合时,染料和马来酰亚胺反应性基团
之间的 C5 间隔臂增强了染料的荧光。当 pH 控制在 7 左右
时,分子中的胺被质子化而不具有活性,所以马来酰亚胺可
以选择性地标记硫醇类物质。
染料是5-和6-异构体的混合物,其适用于蛋白质标记,
或标记其他大分子。
标记蛋白参考步骤:
1. 取待标记蛋白,将其溶解于 pH7.0-7.5 的缓冲液(例如
10-100 mM磷酸盐, Tris或HEPES) 中, 使其终浓度为50-100
μM。
2. 若需要, 二硫键可以通过使用还原剂 (10倍以上) 如TCEP
还原成硫醇进行标记。
3. 如果在步骤 2 中使用 DTT,并且通过透析除去过量的
DTT,则需要在氮气或氩气下进行标记反应,以防止反应过
程中形成二硫键。因此,在二硫化物还原反应后,蛋白质溶
液需要通过使氮气或氩气通过溶液约 10 min 来脱氧,然后
将溶液保持在惰性气体下。如果在步骤 2)中使用TCEP,
则过量的 TCEP 可以防止形成二硫化物, 因此不需要惰性气
体。
4. 在 DMF或 DMSO中制备 10-20 mM 的染料储备液。
5. 将染料储备液滴加到搅拌的蛋白质溶液中。通常情况下,
染料与蛋白质的摩尔比约为 10 – 20 : 1。
6. 继续在黑暗中将所得溶液在室温下搅拌 2 h。对于在室温
下不稳定的蛋白质,反应可以在 4℃下进行过夜。
7. 加入过量的硫醇化合物如巯基乙醇或谷胱甘肽和多余的
染料发生反应。
8. 通过凝胶过滤或透析分离产物。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭,请注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于科研
5(6)-TAMRA-C5-maleimide(5(6)-TAMRA-C5-马来酰-亚胺)