产地 | 上海 |
品牌 | XKBio |
货号 | XK1008 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 1 mL |
纯度 | 100% |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
ROS 荧光探针-DHE产品说明书
ROS 荧光探针-DHE
产品货号:XK1008
产品规格:1 mL(5 mM in DMSO)
产品参数
Ex/Em: 355/420 nm
CAS号:38483-26-0
分子式:C21H21N3
分子量:315
分子结构图:
储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
DHE(Dihydroethidium),可自由透过活细胞膜进入细胞
内,并被细胞内的 ROS 氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可
掺入染色体 DNA 中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧
光的产生,可以判断细胞 ROS 含量的多少和变化。DHE 在
细胞内主要被超氧阴离子型 ROS 氧化,用流式细胞仪或荧
光显微镜可直接观察, 是一种快速简便的组织或培养活细胞
中 ROS 经典检测方法。
使用说明
1. 染色方法:
(1)探针溶液可在新鲜培养液、缓冲盐溶液或组织灌流液
中稀释到所需浓度,以此染色液更换细胞培养液或灌流液;
也可直接向细胞孵育液或灌流液中加入探针至所需浓度。
(2)依据细胞ROS含量的不同,DHE终浓度可选择在1
μM~100 μM的范围,孵育时间可选择10~90 min。孵育可在
37℃或室温进行,要求避光。
(3)孵育结束后,用新鲜溶液清洗细胞或组织。
2. 荧光显微照相操作方法:
(1)对贴壁生长细胞或活组织,可直接在荧光显微镜下观
察;对悬浮生长细胞,取25-50 μL细胞悬液滴到一张显微载
玻片上,再盖上一张盖玻片。
(2)荧光显微镜下,用蓝光或绿光激发,观察和拍摄细胞
红色发射图像,ROS阳性细胞在整个核区被染成红色;用紫
外光激发时,胞浆中未氧化的DHE可发出蓝色荧光。
3. 流式细胞分析操作方法:
(1)对贴壁生长细胞,用胰酶消化制备成单细胞悬液;对
悬浮生长细胞,直接收集细胞。用0.5~1 mL冰冷PBS重悬细
胞(5~10万)。
(2)采用 480~535 nm 波长激发,测定 590 nm~610 nm 以
上的发射,细胞应可分成两个亚群:ROS 阴性细胞仅有很
低的荧光强度,ROS阳性细胞有较强的红色荧光。
注意事项
1. DHE在光照和空气中易被氧化,注意避光保存。
2. 该试剂可用于体外培养活细胞、培养或灌流组织及组织
冰冻切片的检测。
3. 对不同的细胞和组织,应选择合适的孵育时间和浓度,
以观察 ROS的变化。
本产品仅用于科研
ROS 荧光探针-DHE