NM4-64神经元荧光探针 产品说明书 
NM4-64神经元荧光探针 
产品货号：XK4072
产品规格：1 mg 
应用范围：神经荧光染料 
产品参数 
外观：可溶于水的紫色固体 
Ex/Em：543/- nm, (emission in MeOH is too weak to measure) 
Ex/Em：510/750 nm (in membranes)   
分子式：C29H45N4Cl3 
分子量：555.5 
储存条件 
-20℃避光保存，有效期见外包装。 
产品介绍 
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料，用
于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有
亲脂性尾部（两个碳链）和带阳离子的高亲水性头部。神经
末梢染料被命名为 NerveRed 或 NerveGreen 后接一个碳数，
表示亲脂性尾巴的长度。NM 染料具有相似的结构，此外，
它们在带正电的头部具有醛固定胺。 
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡
来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时，染料的水相部分
没有荧光，而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。
神经刺激后，在进行胞吞作用时，染料被包裹在囊泡内，因
此，洗去细胞表面附着的染料后，荧光信号强弱表示新形成
的囊泡的数量的多少。反之，在胞吐作用时，染料与神经递
质一起从囊泡释放，导致荧光信号减少。因此，荧光强度的
变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光
增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率
——“解离速率”因染料种类而异。通常，具有较长亲脂性
尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力，因此具有较
高的结合速率和较低的解离速率。 
本产品等同于 AM4-64，NM4-64 染料能用于固定细胞
染色。 
实验操作 
以下是在盖玻片上对培养的神经元细胞的神经末梢染
色，然后进行固定和免疫染色的方案。   
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞
囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜;  在室温或
37℃下，染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用台氏
液液或其它缓冲液，可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒
素（TTX），其目的是阻断动作电位并防止染色后的突触囊
泡释放。用于特定实验的 方案需要由实验者摸索。   
1.  在 50 mM  台氏液中稀释神经末梢染料至最终浓度为 4 
μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min，使
细胞完全浸没。 
2.  将盖玻片转移至台氏液  + 0.5 μM 河豚毒素（TTX）溶液
中，室温下孵育 1 min。 
3.  室温下，用台氏液  + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻
片。 
4.  固定。将盖玻片用4%多聚甲醛，室温固定 20 min。 
5.  将盖玻片直接转移至预冷的含0.01%Triton X-100的PBS
中，4℃放置 10 min。 
6.  预冷的PBS 洗三次，每次1 min。 
7.  在含有一抗的10%的血清/PBS 中，4℃染色3 h。抗体浓 
 度应该为常规免疫荧光染色的两倍。 
8.  预冷的PBS 洗三次，每次1 min。 
9.  在含有二抗的2%的血清/PBS 中，4℃染色40 min。抗体
浓度与常规免疫荧光染色的相同即可。 
10.  预冷的PBS 洗三次，每次1 min。 
11.  荧光显微镜下拍照观察。 
图. NM4-64 在脂质体中的吸收和发射光谱

本产品仅用于科研

NM4-64神经元荧光探针