产地 | 上海 |
品牌 | XKBio |
货号 | XK4006 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 5 mg |
纯度 | 100% |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
DiR(细胞膜近红外荧光探针)产品说明书
DiR(细胞膜近红外荧光探针)
产品货号:XK4006
产品规格:5 mg
应用范围:细胞膜染色,细胞融合、粘附和迁移示踪剂,小动物成像
产品参数
外观:可溶于乙醇、DMF 或DMSO 的深蓝绿色固体
Ex/Em(MeOH) = 748/780 nm
CAS 号:100068-60-8
分子式:C63H101IN2
分子量:1013.4
分子结构图:
储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
DiR 是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常
用于标记细胞质膜。DiR 的两个18-碳链插入到细胞膜,从
而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染
料转移。
DiR(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如 DiI(橙
色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用,
为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。
DiR染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)
的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定
透化(室温下用0.1% TritonX-100透化)后,也可以很好地
进行质膜染色。
使用方法
1. 染色液制备
(1)配制储液:储液用无水 DMSO 或无水 EtOH 配制,浓
度 1~5 mM。
注:未使用的储液建议分装后储存在-20℃,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,
HBSS或 PBS)稀释储液,配制浓度为 1~5 μM的工作液。
注: 工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。
建议从推荐浓度的 10倍范围内开始 浓度的摸索。
2. 悬浮细胞染色
(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为
1×106
/mL。
(2)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞 培养时间不
同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到
均一的标记效果。
(3)孵育结束,1000~1500 rpm离心 5 min。倾倒上清液,
再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。
(4)重复步骤(3)两次以上。
3. 贴壁细胞染色
(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表
面保持湿润。
(3)在盖玻片的一角加入 100 μL的染料工作液,轻轻晃动
使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞 培养时间不
同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到
均一的标记效果。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3次,每次用
预温的培养基覆盖所有细胞, 孵育 5~10 min, 然后吸干培养
基。但要使表面保持湿润。
4. 结果检测
样品可在培养基中进行检测, 可通过荧光显微镜成像或
流式细胞仪分析。
注意事项
1. DiR 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在
PBS中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液
会导致荧光背景较高。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧
光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实
本产品仅用于科研
DiR(细胞膜近红外荧光探针)