产地 | 上海 |
品牌 | XKBio |
货号 | XK4010 |
用途 | 科研 |
包装规格 | 10 mg |
纯度 | 100% |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
DiI(细胞膜橙红色荧光探针)
DiI(细胞膜橙红色荧光探针)
产品货号: XK4010
产品规格: 10 mg
目录价(元):400
推荐仪器:荧光显微镜
产品参数
储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
DiI 即 DiIC18(3),全称为 1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'tetra- methylindocarbocyanine perchlorate,是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI 是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiI 在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。常与 DiA 一起用于细胞膜双色标记。
DiI 作为示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer),可以被广泛用于正向或逆向、活的或固定的神经等细胞或组织。DiI 通常不会影响细胞的生存力(viability)。被 DiI 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达 4 周,在体内可以长达一年。DiI 在被固定的神经元细胞膜上的迁移速率为 0.2-0.6 mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为 6 mm/day。
DiI 除了用于细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合和粘附、发育或移植过程中细胞的迁移,通过 FRAP(光脱色荧光恢复技术)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiI 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。
注意事项
1. DiI 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
先用DiI对细胞膜进行染色,后用DAPI染核
◆DiI细胞膜染料,除了在549nm下有红光外,在488nm下有绿色吗?
该染料在488nm激发处,有微弱的激发,如果染料浓度太大或者曝光太强的话,会在488nm处有微弱的荧光,建议调整曝光和染料浓度
◆DiI也可以染色细胞内的细胞器膜吗?
可以,因为DiI染色细胞膜是非特异性的,所以细胞器的膜也会被染上色,如果不想细胞器染色太明显,可以减少孵育时间或者将染料浓度降低
◆细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果 ,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中-共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间