Annexin V-APC偶联物产品说明书
Annexin V-APC偶联物
产品货号：XK6080S
产品规格：0.1 mL, 1 mL
储存条件
4℃避光冷藏，请勿冻存。有效期见外包装。
光谱特性
Annexin V-APC：Ex/Em = 650/660 nm
产品介绍
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面， 这些细胞膜表面
的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞
膜外，使 PS 暴露在细胞膜外表面。Annexin V具有易于结
合到磷脂类如 PS 的特性，对 PS 有高度的亲和性。因此，
该蛋白可作为敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。
Annexin V-APC可以与7-AAD/PI等联合使用， 来检测细
胞凋亡情况。7-AAD/PI可被排除在活细胞和早期凋亡细胞
之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞可以同时被Annexin
V-APC和7-AAD结合染色呈现双阳性，从而来区分活细胞、

早凋细胞与晚凋细胞。

使用方法
1. 根据实验要求诱导细胞凋亡。检测样品中应包含未经处
理的细胞样品， 作为阴性对照。 此外， 设定一组样品做单染，
用于调节补偿。
2. 沉淀细胞。
悬浮细胞：1000 rpm，离心 5 min 沉淀细胞；
贴壁细胞：用不含 EDTA 的胰酶消化细胞，1000 rpm，
离心 5 min 沉淀细胞，胰酶消化时间不宜过长，以防引起
假阳性。对于特定的细胞，如果细胞无法完全离心至离心管
底， 可以适当延长离心时间或稍微增大转速。 小心吸除上清，
可以残留约 50 μL 左右的培养液，以避免吸走细胞。
注：细胞用胰蛋白酶消化后，使细胞在 培养条件和
最适培养基中恢复约30 min，然后再染色。因为胰蛋白酶消
化会暂时破坏质膜，允许Annexin V结合磷脂酰丝氨酸在细
胞膜的细胞质表面上，从而导致假阳性染色。
3. 加入约1 mL 4℃预冷的 PBS，重悬细胞，再次离心沉淀
细胞，小心吸除上清。
4. 用适当的缓冲液重新悬浮细胞，调节其浓度1-5×10^
6/mL
（缓冲液可选择终浓度为 2 mM Hepes/NaOH, pH 7.4，28
mM NaCl，0.5 mM CaCl2溶液）。
5. 取100 μL的细胞悬液于5 mL流式管中， 加入5 μL Annexin
V-APC 混匀后于室温避光孵育5 min。
6. 加入10 μL 20 μg/mL的 7-AAD 或 PI，并加400 μL PBS，
立刻进行流式检测。流式细胞仪检测时，Annexin V-APC用
633 nm激发器激发， 发射波长660 nm，建议使用FL4或
RL1通道检测。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注
意避光，以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Annexin V-APC偶联物