647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒产品说明书
647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
产品货号：XK6026S
产品规格：10T, 50T, 100T
产品内容：
组分 规
格
6026S（10T） 6026M（50T） 6026L（100T）
A. 1×Annexin V 结合缓冲液 10 mL 50 mL 50 mL×2
B. YF®647A-Annexin V 50 μL 250 μL 500 μL
C. PI 100 μL 500 μL 1 mL
储存条件
4℃避光冷藏，请勿冻存。有效期见外包装。
光谱特性
647A-Annexin V：Ex/Em = 650/665 nm
PI：Ex/Em = 535/617 nm (with DNA)
产品介绍
647A-Annexin V和PI凋亡试剂盒提供了一种快速
简便的方法， 通过标记早期凋亡细胞 （远红） 和坏死细胞 （红
色），用于检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪或
其它荧光检测设备进行检测。
YF®647A-Annexin V 可以标记凋亡细胞。Annexin V 选
择性结合磷酯酰丝氨酸（phosphatidylserine，简称PS）。在
细胞发生早期凋亡时，磷酯酰丝氨酸会外翻到细胞表面，即
细胞膜外侧。用远红荧光探针 YF®647A标记的 Annexin V，
即 YF®647A-Annexin V，可以结合外翻的磷酯酰丝氨酸，从
而检测细胞凋亡的重要特征。我们公司的 YF®647A 染料与
荧光素/FITC 相比，荧光亮度更高，且不受环境中 pH 的影
响，具有良好的光稳定性。
碘化丙啶 （Propidium Iodide, PI） 是一种DNA 结合染料，
它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞
的细胞核。PI 可以由 488，532 或 546 nm 的激光激发，呈

现红色荧光。

使用方法
下列实验方案以星形孢菌素诱导 Jurkat 细胞凋亡为例。 如果
使用其他诱导剂和其他类型的细胞，实验条件需要调整。
1．流式细胞检测
（1）根据实验要求诱导细胞凋亡。检测样品中应包含未经
处理的细胞样品，作为阴性对照；一组样品做单染，用于调
节补偿。
（2）收集细胞。悬浮细胞：300 g，4℃离心5 min收集细胞；
贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后300 g，4℃离心5 min
收集细胞，胰酶消化时间不宜过长，以防引起假阳性。
注：细胞用胰蛋白酶消化后，在 培养条件和培养基中恢
复约30 min后染色，避免假阳性。
（3）用预冷的PBS洗涤细胞两次，300 g，4℃下离心5 min，
收集1-5×105
个细胞并用100 μL 1×结合缓冲液重悬细胞。
（4） 每管加入4-5 μL的YF®647A -Annexin V和5 μL的PI工作
液。
注：推荐准备两管额外的细胞，每管只加入一种单染染料
（YF®647A-Annexin V 和 PI），用于流式单染的补偿调节。
（5）室温避光孵育10-15 min，为避免细胞凋亡进程，孵育

647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒