Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)产品说明书
Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)
产品货号:XK6024S
产品规格:20T, 50T, 200T, 1000T
组分
规格
F6024S(20T) F6024M(50T) F6024L(200T) F6024XL(1000T)
A. 5×Firefly Luciferase Lysis Buffer 2 × 1 mL 5 mL 20 mL 100 mL
B. Firefly Luciferase Assay Buffer 2 × 1 mL 5 mL 20 mL 100 mL
C. D-Luciferin 0.4 mg 1 mg 4 mg 20 mg
储存条件
-80℃保存。萤火虫萤光素酶检测液(B+C)混合液不可反
复冻融,建议进行小批量分装,并于-20℃(最长可储存 1
个月)或-80℃(最长可储存 1 年)条件下储存。有效期见
外包装。
产品介绍
真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的
检测,生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤
光素酶能催化底物萤光素的转化,并发射出光子。该产品为
萤火虫萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快
速、灵敏、稳定的检测方法。能够检测 10-20
mol的萤光
素酶,在 10-14
至 10-20
mol 的酶浓度范围内呈很好的线性关
系。
产品特点
1. 快速:细胞裂解在 10-15 min 内完成。
2. 方便:试剂易于配制,样品检测步骤简单。
3. 灵敏:能够检测 10-20
mol的萤光素酶。
4. 酶的浓度线性范围可达 8个数量级。
使用方法
1. 细胞裂解
(1)将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加 PBS轻轻
洗涤(贴壁细胞可直接进行此操作,悬浮细胞要离心收集细
胞)。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用无菌水按 4:1稀释
A 组分), 然后将培养板放在微型震荡器上室温震荡15 min,
充分裂解细胞。
细胞培养板
96
孔板
48
孔板
24
孔板
12
孔板
6
孔板
裂解液体积 30μL 60μL 120μL 240μL 480μL
注:裂解产物可室温保存 6 h,-70℃可长期存放(裂解产物
不能多次反复冻融)。
(2)将充分裂解后的裂解产物,10000-15000 rpm离心 3-5
min。离心后将上清液移入新的 EP管中进行后续检测。
2. 萤光素酶检测
(1)按照仪器说明书将荧光测定仪打开,设定参数,测定
时间为 10 s,测定间隔为 2 s。
(2)将细胞裂解产物按照 20~100 μL 的体积加入测量管中
(保持每次样品量一致),另外加入 100 μL 萤火虫萤光素
酶检测液,充分混匀后测定 RLU(Relative light unit)。
注:萤火虫萤光素酶检测液不能反复冻融,若单次实验用量
较少,建议按照单次使用量分装成小规格。
Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)