PicoGreenTM 核酸荧光染料产 品 说 明 书
PicoGreenTM 核酸荧光染料
产品货号：XK2023
产品规格：1 mL
储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。
产品参数
Ex/Em：480/520 nm（结合 dsDNA）
产品介绍
PicoGreen是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品，
这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术：cDNA文库的
构建、亚克隆的DNA-片段纯化及应用，比如进行DNA定量、
产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量的检测方
法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷
酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大，并且还会受到核
酸制备过程中污染物的干扰，无法区分DNA和RNA，而且
这种方法不灵敏 （5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1） 。 PicoGreen
定量检测方法简单、方便，成为生物制品残留DNA检测的
标准。
PicoGreen 只有与 dsDNA 结合后才发出荧光， 并且所发
荧光强度与 DNA 浓度成正比。PicoGreen 可以检测出 25
pg/mL-1000 ng/mL 范围内的 dsDNA，且线性关系较好
(R2

>0.99)。

使用方法
试剂制备
PicoGreen dsDNA定量试剂是以1 mL的浓缩液形式保
存在无水的DMSO（二甲基亚砜）中。实验时，配制
2×PicoGreen工作液：将浓缩液用1×TE（10 mM Tris-HCl，
1 mM EDTA，pH 7.5）按1:200的比例稀释。对于终体积为
200 μL的检测体系， 如需准备足够20个样品测定的工作液，
可在2 mL 1×TE中加入10 μL PicoGreen；对于终体积为2
mL的检测体系，如需准备足够20个样品测定的工作液，则
需要在20 mL 1×TE中加入100 μL PicoGreen浓缩液。 由于试
剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。PicoGreen
见光易降解，因此要注意避光保存。
溶液 在配制好数小时内使用，以保证 结果。
实验方法
1. 标准品工作液的配制：
Sigma小牛胸腺嘧啶DNA干粉1 mg（Tris，NaCl等浓度
已成标准体系），加入1 mL双蒸水，配制成1 mg/mL的标准
液。
2. 染料工作液的配置：
5 μL PicoGreen加入1 mL TE （注意： 用1×TE将PicoGreen
稀释200倍，现用现配，注意避光）。
3. 标准液稀释：
（1） 母液稀释： 取10 μL （1 mg/mL） 标准液加入到990 μL TE
溶液中，稀释成10 μg/mL，取10 μL（10 μg/mL）标准液加
入到990 μL TE 溶液中，稀释成100 ng/mL。
（2）倍比稀释：取800 μL（100 ng/mL）的标准液加入到200
μL TE溶液中，浓度为80 ng/mL，取500 μL（80 ng/mL）的
标准液加入到500 μL TE溶液中，稀释到40 ng/mL；依次倍
比稀释，配成20 ng/mL、10 ng/mL、5.0 ng/mL、2.5 ng/mL。
4. 标准曲线的制备：倍比稀释后的各梯度标准品溶液和染
料工作液各取100 μL混匀，避光室温放置5 min。使用FB-15
型便携式荧光仪检测样品的荧光值： 将混合后的溶液加入微
量比色皿，注意不要在样品中引入气泡，轻弹微量检测皿的
PicoGreenTM 核酸荧光染料