五种致泻性大肠埃希氏菌鉴定试剂盒（PCR法）

五种致泻性大肠埃希氏菌鉴定试剂盒（PCR法）可针对样品中五种致泻性大肠埃希氏菌成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线   判定结果。本产品用于五种致泻性大肠埃希氏菌成分的检测，检出限为 0.1%

产品组成：

保存条件：

请于-20℃条件下保存，有效期12个月。

适用仪器：

ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。

自备仪器和耗材：

①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。

注意事项：

1. 本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。

1） 一区：样本制备区。

2） 二区：模板添加区。

3） 三区：扩增及产物分析区。

分区之间*进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。

2. 实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。

3. 严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。

4. 反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒。并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。

5. 反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。

6. 不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。

结果判定：

检测样品 无Ct 值，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可报告样品阴性，不含有五种致泻性大肠埃希氏菌成分或含量低于检测限；

检测样品Ct≤30，曲线呈“S”型扩增曲线，可直接报告样品阳性，含有五种致泻性大肠埃希氏菌核酸成分；

检测样品 Ct＞30，可直接报告样品阴性，不含有五种致泻性大肠埃希氏菌核酸成分或含量低于检测限。

NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。

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